甘草中甘草苷的含量测定
Gancao
GLYCYRRHIZAERADIXETRHIZOMA
本品为豆科植物甘草(GlycyrrhizauralensisFisch.、胀果甘草GlycyrrhizainflataBat.或光果甘草GlycyrrhizaglabralL.的干燥根和根茎。春、秋二季采挖，除去须根，晒干。
【性状】甘草根呈圆柱形，长25～100cm，直径0.6～3.5cm。外皮松紧不一。表面红棕色或灰棕色，具显著的纵皱纹、沟纹、皮孔及稀疏的细根痕。质坚实，断面略显纤维性，
黄白色，粉性，形成层环明显，射线放射状，有的有裂隙。根茎呈圆柱形，表面有芽痕，断面中部有髓。气微，味甜而特殊。
胀果甘草根和根茎木质粗壮，有的分枝，外皮粗糙，多灰棕色或灰褐色。质坚硬，木质纤维多，粉性小。根茎不定芽多而粗大。
光果甘草根和根茎质地较坚实，有的分枝，外皮不粗糙，多灰棕色，皮孔细而不明显。
【鉴别】(1)本品横切面：木栓层为数列棕色细胞。栓内层较窄。韧皮部射线宽广，多弯曲，常现裂隙；纤维多成束，非木化或微木化，周围薄壁细胞常含草酸钙方晶；筛管群常因压缩而变形。束内形成层明显。木质部射线宽3～5列细胞；导管较多，直径约至160μm；木纤维成束，周围薄壁细胞亦含草酸钙方晶。根中心无髓；根茎中心有髓。
粉末淡棕黄色。纤维成束，直径8～14μm，壁厚，微木化，周围薄壁细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维。草酸钙方晶多见。具缘纹孔导管较大，稀有网纹导管。木栓细胞红棕色，多角形，微木化。
(2)取本品粉末1g，加乙醚40ml，加热回流1小时，滤过，弃去醚液，药渣加甲醇30ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水40ml使溶解，用正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用水洗涤3次，弃去水液，正丁醇液蒸于，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液。另取甘草对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取甘草酸单铵盐对照品，加甲醇制成每lml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照《薄层色谱法检验标准操作程序》(附录ⅥB)试验，吸取上述三种溶液各l～2μl，分别点于同一用1％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯一甲酸一冰醋酸一水(15：l：1：2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷
以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；在与对照品色谱相应的
位置上，显相同的橙黄色荧光斑点。
【检查】水分不得过12.0％(附录ⅨH第一法)。
总灰分不得过7.0％(附录ⅨK)。
酸不溶性灰分不得过2.0％(附录ⅨK)。
重金属及有害元素照铅、镉、砷、汞、铜测定法(附录ⅨB原子吸收分光光度法或电感耦合等离子体质谱法)测定，铅不得过百万分之五；镉不得过千万分之三；砷不得过百万分之二；汞不得过千万分之二；铜不得过百万分之二十。
有机氯农药残留量照农药残留量测定法(附录ⅨQ有机氯类农药残留量测定)测定，六六六(总BHC)不得过千万分之二；滴滴涕(总DDT)不得过千万分之二；五氯硝基苯(PCNB)不得过千万分之一。
【含量测定】照《高效液相色谱法检验标准操作程序》测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.05％磷酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为237nm。理论
板数按甘草苷峰计算应不低于5000。
时间（分钟）流动相A（%）流动相B（%）
0~8 19 81
8~35 19~50 81~50
35~36 50~100 50~0
36~40 100~19 0~81
对照品溶液的制备取甘草苷对照品、甘草酸铵对照品适量，精密称定，加70％乙醇分别制成每1ml含甘草苷20μg、甘草酸铵0.2mg的溶液，即得(甘草酸重量一甘草酸铵重量／1.0207)。
供试品溶液的制备取本品粉末(过三号筛)约O.2g，精
密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％乙醇100ml，密塞，称
定重量，超声处理(功率250W，频率40kHz)30分钟，放冷，再
称定重量，用70％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤
液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各
10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品按干燥品计算，含甘草苷(C21H22O9)不得少于0.50％，甘草酸(C42H62O16)不得少于2.0％。
